目前病毒檢測主要是核酸檢測和抗原檢測。核酸檢測主要是通過實時熒光定量PCR檢測新冠病毒保守的片段區(qū)域的序列,以確定體內(nèi)是否含有該病毒。當(dāng)定量PCR檢測出有該序列,說明有可能感染了病毒,會通過多次PCR進(jìn)行檢測并結(jié)合臨床檢測指標(biāo)進(jìn)行確診。
外泌體粒徑分析、濃度檢測外泌體粒徑分析方法為納米顆粒跟蹤分析,其原理是對每個顆粒的布朗運(yùn)動進(jìn)行追蹤和分析,結(jié)合 Stockes-Einstein 方程式計算出納米顆粒的流體力學(xué)直徑和濃度。NT A技術(shù)已被外泌體研究領(lǐng)域認(rèn)可為外泌體表征手段之一。相較于其他表征方式,NT A技術(shù)的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快。
熒光素酶報告實驗由于其快捷、廉價、靈敏度高和可定量等優(yōu)點,已普遍用于細(xì)胞生物學(xué)的研究,如基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄水平的研究。下面以報告基因?qū)嶒灒▎幼樱槔,來介紹雙熒光素酶報告系統(tǒng)。整個報告基因的核心是將待定的調(diào)控元件與報告基因進(jìn)行融合,檢測報告基因的表達(dá)。熒光素酶報告實驗流程
ChIP 與其它方法結(jié)合,擴(kuò)大了其應(yīng)用范圍。ChIP是一種穩(wěn)定,可靠,應(yīng)用十分普遍的鑒定活細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)-DNA相互作用的方法,不僅適用于基因組上特定位點的檢測,也適用于全基因組范圍的描述,還可以用于大量樣本的高通量檢測。
在活細(xì)胞內(nèi)使用甲醛將DNA和蛋白交聯(lián),使用超聲將染色質(zhì)切成很小的片斷,并沉淀下來。通過目的蛋白的抗體將蛋白免疫共沉淀,富集。通過定量PCR檢測使用特異性引物對蛋白可能結(jié)合的DNA進(jìn)行擴(kuò)增檢測。B ChIP檢測結(jié)果分析示例圖。
細(xì)胞免疫熒光染色是以熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體而進(jìn)行抗原定位的技術(shù)。在細(xì)胞中,通過特定抗體的標(biāo)記,可以檢測目的蛋白表達(dá)量和表達(dá)定位。是細(xì)胞中最常用的可直觀觀察細(xì)胞內(nèi)蛋白定位和表達(dá)的實驗方法。